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抑菌圈法:衡量殺菌防霉劑效果的常用方法
更新時間:2022-05-24 點(diǎn)擊次數(shù):1364次
抑菌圈法是衡量殺菌防霉劑效果的一種方式,主要用于測定殺菌防霉劑對細(xì)菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用,是定性或半定量的方法。通過殺菌防霉劑在瓊脂平板上的擴(kuò)散能力來初步篩選更有效的殺菌防霉劑品種。
一、抑菌圈的用具和材料:
霉菌培養(yǎng)皿,無菌吸管(或針筒),圓片濾紙(直徑50px),帶玻璃珠的無菌水,帶過濾漏斗的三角牌,鑷子,接種針(環(huán)),熔化狀態(tài)的瓊脂培養(yǎng)基(建議保溫于45℃左右水浴中),一定濃度的藥劑,供試驗用的菌種。
二、抑菌圈的試驗過程:
1.用接種環(huán)挑取各試管斜面的菌種于帶玻璃珠的無菌水中,用手振蕩數(shù)分鐘使孢子分散,過濾后制成混合孢子懸液。
2.用無菌吸管(或針筒)向各培養(yǎng)皿中注入一定濃度的混合孢子懸浮液0.5mL。
3.向各培養(yǎng)皿內(nèi)注入15Ml~20ml的熔化狀瓊脂培養(yǎng)基(約45℃),將菌液與培養(yǎng)基混合均勻,待其冷卻。
4.用鑷子將圓片濾紙在不同濃度的防霉劑中浸漬片刻,取出置于帶菌培養(yǎng)基平板的中央,蓋上蓋子
5.置適宜溫度下,培養(yǎng)2~3d,觀察濾紙片圓片周圍抑菌圈的有無及大小。
以上就是抑菌圈法的主要試驗過程,由于濾紙圓片所吸附的藥液慢慢向四周擴(kuò)散,因此在濾紙片的周圍就出現(xiàn)清晰的抑菌圈(加入該防霉劑對供試菌有抑制效果)。抑菌圈的大小代表藥劑抗菌力的高低。在一定的藥劑濃度范圍內(nèi),藥劑的濃度越高則抑菌圈的直徑越大。此法同樣適合于測定單個菌的抗菌效果。